Χρώση Γκίμσα

Η χρώση Γκίμσα (Giemsa), που πήρε το όνομά της από τον Γερμανό χημικό και βακτηριολόγο Gustav Giemsa, είναι μια χρώση νουκλεϊκού οξέος που χρησιμοποιείται στην κυτταρογενετική και για την ιστοπαθολογική διάγνωση ελονοσίας και άλλων παράσιτων.^[1]

Χρήσεις

Καρυοτύπηση ανθρώπινων αρσενικών χρωμοσωμάτων χρησιμοποιώντας χρώση Giemsa

Είναι ειδική για τις φωσφορικές ομάδες του DNA και προσκολλάται σε περιοχές του DNA όπου υπάρχουν υψηλές ποσότητες δεσμών αδενίνης-θυμίνης. Η χρώση Giemsa χρησιμοποιείται στη ζώνωση Giemsa, που συνήθως ονομάζεται ζώνωση G, για τη χρώση χρωμοσωμάτων και χρησιμοποιείται συχνά για τη δημιουργία ενός καρυογράμματος (χάρτη χρωμοσωμάτων). Μπορεί να αναγνωρίσει χρωμοσωμικές εκτροπές όπως μετατόπιση και αναδιατάξεις. Χρωματίζει τον τροφοζωίτη Trichomonas vaginalis, ο οποίος εμφανίζεται με πρασινωπή έκκριση και κινητά κύτταρα σε υγρή προετοιμασία. Η χρώση Giemsa είναι επίσης μια διαφορική χρώση, όπως όταν συνδυάζεται με τη χρώση Wright για να σχηματιστεί η χρώση Wright-Giemsa. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη της προσκόλλησης παθογόνων βακτηρίων στα ανθρώπινα κύτταρα. Χρωματίζει διαφορετικά τα ανθρώπινα και τα βακτηριακά κύτταρα βιολετί και ροζ αντίστοιχα. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για ιστοπαθολογική διάγνωση των ειδών Πλασμώδιο που προκαλούν ελονοσία^[2] και κάποια άλλα παράσιτα του αίματος σπειροχαίτες και πρωτόζωα. Χρησιμοποιείται επίσης για τη χρώση των κυττάρων Wolbachia στον ιστό ξενιστή.^[3] Η χρώση Giemsa είναι μια κλασική χρώση επιχρίσματος αίματος για δείγματα επιχρίσματα περιφερικού αίματος και μυελού των οστών. Τα ερυθροκύτταρα χρωματίζονται ροζ, τα αιμοπετάλια παρουσιάζουν ανοιχτό ροζ, το κυτταρόπλασμα των λεμφοκυττάρων χρωματίζεται γαλάζιο, το κυτταρόπλασμα του μονοκυττάρου χρωματίζεται ανοιχτό γαλάζιο και τα λευκοκύτταρα της πυρηνικής χρωματίνης χρωματίζει ματζέντα. Χρησιμοποιείται επίσης για την οπτικοποίηση του κλασικού σχήματος "πείρου ασφαλείας" στο Yersinia pestis.

Ιογενείς εγκλείσεις ματιού κουκουβάγιας", που σχετίζονται με λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊούς.

Η χρώση Giemsa χρησιμοποιείται επίσης για την οπτικοποίηση χρωμοσωμάτων. Αυτό είναι ιδιαίτερα σημαντικό για την ανίχνευση της λοίμωξης από κυτταρομεγαλοϊό, όπου το κλασικό εύρημα θα ήταν μια ιική έγκλιση "ματιού κουκουβάγιας".^[4] Το Giemsa χρωματίζει τον μύκητα Ιστόπλασμα, τα βακτήρια Χλαμύδια και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αναγνώριση μαστοκυττάρων.^[5]

Παραγωγή

Το διάλυμα Giemsa είναι ένα μείγμα μπλε του μεθυλενίου, ηωσίνης και Azure B. Η χρώση παρασκευάζεται συνήθως από σκόνη Giemsa που διατίθεται στο εμπόριο. Μία λεπτή ταινία του δείγματος σε μια αντικειμενοφόρο πλάκα μικροσκοπίου στερεώνεται σε καθαρή μεθανόλη για 30 δευτερόλεπτα, βυθίζοντάς την ή ρίχνοντας μερικές σταγόνες μεθανόλης στην αντικειμενοφόρο πλάκα. Η αντικειμενοφόρος πλάκα βυθίζεται σε ένα πρόσφατα παρασκευασμένο διάλυμα χρώσης Giemsa 5% για 20–30 λεπτά (σε περιπτώσεις έκτακτης ανάγκης μπορεί να χρησιμοποιηθεί 5–10 λεπτά σε διάλυμα 10%), στη συνέχεια ξεπλένεται με νερό βρύσης και αφήνεται να στεγνώσει.^[6]

Παραπομπές

↑ Zipfel, E.; Grezes, J. -R.; Naujok, A.; Seiffert, W.; Wittekind, D. H.; Zimmermann, H. W. (1984). «Über Romanowsky-Farbstoffe und den Romanowsky-Giemsa-Effekt». Histochemistry 81 (4): 337–351. doi:10.1007/bf00514328. ISSN 0301-5564. PMID 6210276.
↑ Shapiro, Howard M.; Mandy, Francis (August 2007). «Cytometry in malaria: moving beyond Giemsa». Cytometry Part A 71 (9): 643–645. doi:10.1002/cyto.a.20453. PMID 17712779.
↑ Riegler, Markus· O’Neill, Scott L. (2006). «The Genus Wolbachia». Στο: Dworkin, Martin· Falkow, Stanley· Rosenberg, Eugene· Schleifer, Karl-Heinz· Stackebrandt, Erko. The Prokaryotes (στα Αγγλικά). Springer. σελίδες 547–561. doi:10.1007/0-387-30745-1_22. ISBN 978-0-387-30745-9.
↑ Woods, G. L.; Walker, D. H. (July 1996). «Detection of infection or infectious agents by use of cytologic and histologic stains». Clinical Microbiology Reviews 9 (3): 382–404. doi:10.1128/cmr.9.3.382. ISSN 0893-8512. PMID 8809467.
↑ Damsgaard, T. E.; Olesen, Anne Braae; Sørensen, Flemming Brandt; Thestrup-Pedersen, Kristian; Schiøtz, Peter Oluf (April 1997). «Mast cells and atopic dermatitis. Stereological quantification of mast cells in atopic dermatitis and normal human skin». Archives of Dermatological Research 289 (5): 256–260. doi:10.1007/s004030050189. PMID 9164634. https://link.springer.com/article/10.1007/s004030050189.
↑ «4.2.2.2. Giemsa stain». impact-malaria.com. Αρχειοθετήθηκε από το πρωτότυπο στις 29 Οκτωβρίου 2013. Ανακτήθηκε στις 28 Οκτωβρίου 2013.

[1] Zipfel, E.; Grezes, J. -R.; Naujok, A.; Seiffert, W.; Wittekind, D. H.; Zimmermann, H. W. (1984). «Über Romanowsky-Farbstoffe und den Romanowsky-Giemsa-Effekt». Histochemistry 81 (4): 337–351. doi:10.1007/bf00514328. ISSN 0301-5564. PMID 6210276.

[2] Shapiro, Howard M.; Mandy, Francis (August 2007). «Cytometry in malaria: moving beyond Giemsa». Cytometry Part A 71 (9): 643–645. doi:10.1002/cyto.a.20453. PMID 17712779.

[3] Riegler, Markus· O’Neill, Scott L. (2006). «The Genus Wolbachia». Στο: Dworkin, Martin· Falkow, Stanley· Rosenberg, Eugene· Schleifer, Karl-Heinz· Stackebrandt, Erko. The Prokaryotes (στα Αγγλικά). Springer. σελίδες 547–561. doi:10.1007/0-387-30745-1_22. ISBN 978-0-387-30745-9.

[4] Woods, G. L.; Walker, D. H. (July 1996). «Detection of infection or infectious agents by use of cytologic and histologic stains». Clinical Microbiology Reviews 9 (3): 382–404. doi:10.1128/cmr.9.3.382. ISSN 0893-8512. PMID 8809467.

[5] Damsgaard, T. E.; Olesen, Anne Braae; Sørensen, Flemming Brandt; Thestrup-Pedersen, Kristian; Schiøtz, Peter Oluf (April 1997). «Mast cells and atopic dermatitis. Stereological quantification of mast cells in atopic dermatitis and normal human skin». Archives of Dermatological Research 289 (5): 256–260. doi:10.1007/s004030050189. PMID 9164634. https://link.springer.com/article/10.1007/s004030050189.

[6] «4.2.2.2. Giemsa stain». impact-malaria.com. Αρχειοθετήθηκε από το πρωτότυπο στις 29 Οκτωβρίου 2013. Ανακτήθηκε στις 28 Οκτωβρίου 2013.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]